色谱条件的确定流动相的选择用反相色谱分离时，其流动相一般有甲醇/水、乙腈/水和四氢呋喃/水混合物的二元体系。文献所报道的有甲醇/水和三氟乙醇/水等流动相。本实验使用甲醇/水的二元流动相，其优点是甲醇既作萃取剂，又作为流动相混合物一个组成，己内酰胺及其环状齐聚物得到很好的分离。
萃取物的梯度洗脱分离色谱己内酰胺（CPL）；2～9.环状二聚体至环状9聚体，下同（Thesamebelow.）检测波长的选择因为己内酰胺及其齐聚物的环形和酰胺基导致光电子不受位置限制，所以在低波长区域有一定的吸收。在实验中，使用了比示差检测器更灵敏的二极管阵列检测器，能够直接定量分析己内酰胺聚合物的萃取物。实验了205～230nm的紫外吸收。从中可以看出，己内酰胺最大吸收波长为212nm，环状齐聚物的最大吸收波长为209nm.综合考虑，选取209nm作为样品的检测波长。
洗脱方式的选择萃取物部分组分的紫外光谱首先采用等度分离样品的萃取物，为甲醇/水=50∶50（体积比）的等度条件下洗脱的色谱；为甲醇/水=40∶60（体积比）的等度条件下洗脱的色谱。从可以看出，1、2和3峰未分开，将影响定量结果；而虽然前面几个峰分离较好，但6以后的峰因保留时间太长及含量太低而检测不到。为了解决这些问题，首次采用了梯度洗脱技术。因为梯度洗脱可提高分离度、缩短分离时间、降低最小检测量和提高分离精度。以甲醇/水=35∶65（体积比）为起始流动相，10min内线性梯度洗脱到甲醇/水=70∶30（体积比），然后在等度条件下洗脱至分离完成。因为在低波长下洗脱，所以基线有一点漂移，但并不影响定性定量分析，而且还可以通过作空白曲线来扣除基线的漂移。
甲醇/水为50∶50的分离通过梯度洗脱，使己内酰胺单体和环状齐聚物得到很好分离，特别是单体和二聚体的分离。采用标样和紫外光谱对主要组分进行了定性，并对峰纯度进行计算，证明每一个峰为单一组分。
己内酰胺标准曲线的绘制为了定量测定所分离出的色谱峰，确定了己内酰胺单体的标准曲线。配制成不同浓度的己内酰胺标准溶液，按照确定的色谱条件进行测定。在实验浓度范围内，己内酰胺的浓度与其峰面积呈良好的线性关系。经线性回归得到己内酰胺的标准方程为：Y=0.3058X+0.0012r=0.9997式中Y――己内酰胺的峰面积（A×min）；X――己内酰胺的浓度（mg/mL）；r――相关系数。
回收率和精密度试验为了考察本方法实验结果的可靠性，进行了精密度试验和回收率试验，得出主要组分峰面积的相对标准偏差小于3%，说明精密度是好的。在同一切片样品中加入已知不同量的己内酰胺标样，然后按样品萃取步骤进行处理，在前述的色谱条件下进行含量测定，再同已知含量进行比较，计算出己内酰胺的回收率为97.6%～98.3%，说明本方法的准确度也是好的。
实际样品的测定用上述方法对不同产地的尼龙6切片进行了测定，结果。其定量方法是：a.己内酰胺单体采用外标法定量；b.用重量法求出总萃取物的含量；c.总萃取物含量扣去单体含量后即为总齐聚物含量，然后对齐聚物峰面积进行归一后乘上总齐聚物含量，即得到单个齐聚物的含量。在此假设了每个齐聚物的紫外吸收系数相同。