分析手段也取得较大进展。Murphy<>发现水或mol/L盐酸。本文用mol/L的盐酸及乙腈提取大豆雌激素，等梯度洗脱，反相高效液相色谱法检测大豆二羟，为研究及开发大豆及其豆制品建立一种操作简单、快速、灵敏、可靠、用二甲亚砜配制的储备液，冰箱保存。大豆雌激素的提取干大豆，研磨成细粉，待用。游离雌激素的提取取大豆粉，置锥形瓶中盐酸，混匀取上清液，用滤膜过滤，进样总雌激素的提取取大豆粉。色谱条件的选择二羟、三羟异黄酮，性质稳定，在酸、有机溶剂中，能保持结构完整及性质的稳定。本实验选择甲醇乙酸铵体积比B，乙酸铵缓冲溶液与甲醇作流动相，pH范围内，二羟、三羟异黄酮的峰面积稳定，表明流动相的pH及浓度不影响定量分析，也不影响分离，但对保留时间有影响：pH值及乙酸铵的浓度增大，其保留时间减小。梯度洗脱也曾用于大豆雌激素的分析，由于柱平衡时间长、基线波动大，在二羟、三羟异黄酮的分析中，不常用梯度洗脱。用乙腈作流动相时，三羟异黄酮与甲氧异黄酮（异构体）不能分离，影响三羟异黄酮的准确定量。
线性范围mmol/L的标准储备液，用甲醇分别稀释待测液。LL进样，峰面积A为横坐标，以浓度c为纵坐标，其线性回归方程为：二羟异黄酮的范围内，二羟、三羟异黄酮浓度与峰面积有良好的线性关系，适于测定各种不同含量的样品。回收率测定取大豆粉份，每份g，号为一组，号为二组。第一组号分别加二羟、三羟异黄酮标准品，号样作为大豆游离雌激素的本底值样品，按项游离雌激素提取方法处理样品。第二组的号样分别加羟、三羟异黄酮标准品，号样作为大豆总雌激素的本底值样品，按项总雌激素提取方法处理样品。测得结果按公式。样品测得含量本底含量加入标准品含量，计算加样回收率，通过提取，二羟、三羟异黄酮的平均回收率，样品精密度用于回收率测定的、号样，分别次进样，其相对标准差，说明在此色谱条件下分析大豆雌激素，数据重复性好，方法可靠。
样品测定把本地产黄豆、白豆，磨成粉，各称g；取本地产黄豆、白豆，用蒸馏水充分浸泡（大于h）分别用粉碎机粉碎，各取g，按项处理样品，提取样品总雌激素从样品测定结果可看到，黄豆、泡黄豆、豆腐、豆腐干含植物雌激素的量较高，可供膳食选择。与雌激素受体结合，诱导产生弱雌激素作用。三羟异黄酮的活性最强，其最低有效剂量是mg经肾脏、随尿排泄；不需加任何还原剂、掩蔽剂就可直接用钨-水杨基荧光酮溴化十六烷基三甲铵分光光度法对mL水中Lg的钨进行准确测定。